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中國(guó)
010-62973229 010-57107806
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類(lèi)的高活性蛋白酶，從布氏白僵菌（Beauveria
bassiana）中純化得到，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。該酶有兩個(gè)ca2+結(jié)合位點(diǎn)，它們離酶的活性中心有一定距離，與催化機(jī)理并無(wú)直接關(guān)系。
然而，如果從該酶中除去ca2+，由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化，催化活性將喪失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。蛋白
酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。在較廣的pH范圍內(nèi)（pH
4-12.5）均有活性，在尿素和SDS中也較為穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力。
規(guī)格：100毫克普通裝或客戶定制
比活性值：38 U/mg蛋白
來(lái)源種屬：酵母菌
分子質(zhì)量：28,650
（二）、產(chǎn)品檢測(cè)報(bào)告
1、稀釋緩沖液
根據(jù)需要，利用20mM Tris-HCL 緩沖液（PH 7.5）溶解成20mg/ml的工作濃度。
2、質(zhì)量說(shuō)明
活性單位定義 | 37℃、PH7.5條件下，每分鐘可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量，定義為一個(gè)單位。 |
脫氧核糖核酸酶殘留 | 以λDNA為底物，37℃消化4小時(shí)以上，未檢測(cè)到脫氧核糖核酸酶活性。 |
核糖核酸酶殘留 | 37℃消化12小時(shí)以上，未檢測(cè)到核糖核酸酶活性。 |
3、酶純度測(cè)定（SDS—PAGE）
結(jié)果：蛋白酶K純度超過(guò)99.2%。
4、酶活性測(cè)定
蛋白酶K比活性值 | ||
產(chǎn)品來(lái)源 | 本產(chǎn)品 | 西格瑪 |
比活性值（U/mg） | 38 | >30 |
5、酶穩(wěn)定性測(cè)定（—20℃冷凍條件下，12個(gè)月的數(shù)據(jù)）
結(jié)果：干粉狀態(tài)正確儲(chǔ)存，一年內(nèi)酶活性保持不變；溶解狀態(tài)酶活性一年內(nèi)降低小于2%。
6、酶質(zhì)檢結(jié)果
序號(hào) | 檢驗(yàn)項(xiàng)目 | 檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn) | 是否合格（合格√） |
1 | 動(dòng)物基因組提?。ǖ鞍酌窴濃度為20mg/ml） | 不影響動(dòng)物基因組的有效提取 | √ |
與不加蛋白酶K的樣品相比，能有效降解蛋白質(zhì) | √ | ||
2 | 降解蛋白質(zhì)能力 | 與15ug BSA 37℃孵育1小時(shí)，BSA可有效降解 | √ |
質(zhì)檢結(jié)論：合格（√） 讓步放行（ ） 需要復(fù)檢（ ） 不合格（ ） | |||
（三）、抑制劑
蛋白酶K是一種絲氨酸蛋白酶，因此可以用苯甲基磺酰氟抑制其作用，苯甲基磺酰氟是一種絲氨酸蛋白酶的抑制劑。在純化蛋白質(zhì)時(shí)用于防止蛋白質(zhì)的降解。
（四）、應(yīng)用范圍
蛋白酶K的用途廣泛，主要的應(yīng)用行業(yè)包括：醫(yī)療及基礎(chǔ)研究領(lǐng)域：基因診斷試劑盒；基因組DNA提取試劑盒、RNA提取試劑盒中去除DNA和RNA制備中的 核酸酶；此外，還應(yīng)用于：皮革工業(yè)（皮革軟化及精細(xì)化、脫毛和軟化、蠶絲脫膠）制備脈沖電泳的染色體DNA；提取組織中非蛋白成分時(shí)，降解含有蛋白質(zhì)雜 質(zhì)；食品、釀造工業(yè)：肉類(lèi)嫩化、酒類(lèi)澄清；洗滌工業(yè)：酶洗衣粉、洗衣液等也有應(yīng)用。
（五）、貯存和使用
干粉條件下有效期為24個(gè)月，液態(tài)時(shí)—20℃保存12個(gè)月?？蛻衾镁彌_液溶解后，需要—20℃貯存。溶解后，最好分裝成若干份，方便使用，避免反復(fù)凍溶。如果需要在2-8℃環(huán)境下放置，超過(guò)三天，建議過(guò)濾除菌或加入抑菌劑如3%疊氮化鈉，防止微生物污染。
孵育溫度為55至65℃，理想孵育溫度為58℃，孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí)；理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。
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